在疫苗研发中,评估保护效果不仅依赖血清抗体滴度,还需要全面理解T细胞、TFH细胞和NK细胞的功能状态。在现实研究中,样本量有限,尤其是儿童或志愿者PBMC样本,传统方法很难在一次实验中获取完整的免疫信息。
以往的ICS panel通常只能评估少数细胞功能或单一细胞类型,无法同时获取T细胞功能、记忆分化、TFH表型和NK细胞信息。这种局限使研究者需要通过多次实验分别测量不同指标,既耗费样本又增加操作复杂性,也难以全面反映免疫应答的全貌。
技术创新提供多维免疫分析可能
OMIP-025为疫苗研发和免疫学研究提供了一个高度整合的分析平台。它可以在有限样本中同时检测T细胞功能、记忆分化、TFH表型和NK细胞,为评估抗原特异性免疫反应的强度、广度和质量提供全面支持,同时也为多维免疫监测和疫苗效果研究提供了可靠参考。
| 靶标 | 荧光素 | 作用 | abinScience推荐 |
| Live/Dead | AViD | 排除死细胞,Monocytes | — |
| CD14 | BV510 | 查看CD14抗体 | |
| CD3 | BV570 |
Lineage T cells |
查看CD3抗体 |
| CD4 | BUV395 | 查看CD4抗体 | |
| CD8 | BV711 | 查看CD8抗体 | |
| CD56 | BV650 | NK cells and NK T-like cells | 查看CD56抗体 |
| CD45RA | APC H7 | Memory/differentiation | — |
| CCR7 | BV785 | 查看CCR7抗体 | |
| CXCR5 | PE-eFluor 610 | Follicular helper T (Tfh) cells | 查看CXCR5抗体 |
| PD-1 | PE-Cy7 | 查看PD-1抗体 | |
| INF-γ | V450 | Function | 查看IFN-γ抗体 |
| IL-2 | PE | 查看IL-2抗体 | |
| INF-α | FITC | 查看TNF-α抗体 | |
| IL-4 | PerCP-Cy5.5 | 查看IL-4抗体 | |
| IL-21 | APC | 查看IL-21抗体 | |
| CD154 | BV605 | 查看CD154抗体 |
图1. OMIP-025圈门策略总览
CD45RA/CXCR5/CCR7/PD-1分析Tfh细胞群。
通过IFN-γ、IL-2、TNF-α、IL-4、CD154、CD45RA、CXCR5等分析不同T细胞表型。
1. FSC-A/H去黏连,通过Time门排除不稳定液流信号,排除死细胞和单核细胞群。
2. CD3/CD56分析不同NK细胞,CD4/CD8圈出Th细胞和Tc细胞,在Th细胞中通过CD45RA/CXCR5/CCR7/PD-1分析Tfh细胞群。
3. 通过IFN-γ、IL-2、TNF-α、IL-4、CD154评估Th和Tc细胞经抗原刺激后的功能反应。
4. 通过CD45RA/CXCR5分析T细胞记忆分化分型。
1. 在单一panel中整合T细胞功能、分化状态与TFH表型
OMIP-025在一个ICS panel中同时整合了多层次的T细胞免疫信息。通过IFN-γ、IL-2、TNF-α、IL-4和IL-21等细胞因子评估抗原刺激后的功能反应,并结合CCR7与CD45RA对T细胞进行记忆分化分型。同时,panel还引入CXCR5与PD-1,用于识别外周循环中的TFH-like CD4 T细胞,使得研究者能够在同一次实验中同时获得功能反应、分化状态以及TFH相关免疫信息。
2. 引入CD154提高抗原特异性CD4 T细胞检测灵敏度
在传统ICS实验中,抗原特异性反应通常依赖细胞因子表达进行识别,但部分低频反应细胞可能不会产生可检测水平的细胞因子。OMIP-025在panel中加入CD154(CD40L)作为抗原特异性CD4 T细胞的敏感标志,并与细胞因子检测结合使用,从而提高低频抗原特异性反应的识别能力,使功能性CD4 T细胞的检测更加稳定和可靠。
3. 纳入NK细胞检测并通过跨panel验证保证检测一致性
为了更全面评估疫苗诱导的免疫反应,OMIP-025在panel中加入CD56,使NK细胞也能够在同一实验体系中被识别并进行功能分析。此外,作者还使用相同样本分别应用OMIP-025和OMIP-014进行检测,并通过一致性分析验证两种panel在核心T细胞功能检测上的高度一致性,证明在扩展marker的同时仍然保持了良好的检测性能和可靠性。
1. 在单一panel中整合T细胞功能、分化状态与TFH表型
OMIP-025在一个ICS panel中同时整合了多层次的T细胞免疫信息。通过IFN-γ、IL-2、TNF-α、IL-4和IL-21等细胞因子评估抗原刺激后的功能反应,并结合CCR7与CD45RA对T细胞进行记忆分化分型。同时,panel还引入CXCR5与PD-1,用于识别外周循环中的TFH-like CD4 T细胞,使得研究者能够在同一次实验中同时获得功能反应、分化状态以及TFH相关免疫信息。
2. 引入CD154提高抗原特异性CD4 T细胞检测灵敏度
在传统ICS实验中,抗原特异性反应通常依赖细胞因子表达进行识别,但部分低频反应细胞可能不会产生可检测水平的细胞因子。OMIP-025在panel中加入CD154(CD40L)作为抗原特异性CD4 T细胞的敏感标志,并与细胞因子检测结合使用,从而提高低频抗原特异性反应的识别能力,使功能性CD4 T细胞的检测更加稳定和可靠。
3. 纳入NK细胞检测并通过跨panel验证保证检测一致性
为了更全面评估疫苗诱导的免疫反应,OMIP-025在panel中加入CD56,使NK细胞也能够在同一实验体系中被识别并进行功能分析。此外,作者还使用相同样本分别应用OMIP-025和OMIP-014进行检测,并通过一致性分析验证两种panel在核心T细胞功能检测上的高度一致性,证明在扩展marker的同时仍然保持了良好的检测性能和可靠性。
(疫苗研发)(肿瘤免疫治疗)(自身免疫病研究)(基础免疫学研究)(免疫细胞发育与分化研究)
OMIP-025在单管中整合了T细胞功能、记忆分化、TFH表型以及NK细胞反应,同时引入CD154等敏感标志,实现了低频抗原特异性细胞的可靠捕获。不仅提高了实验效率,也让有限的样本可以获得最大的信息量,使研究者能够从整体上了解免疫应答的全貌。在疫苗研发、感染免疫研究、儿童免疫学等领域,OMIP-025提供了一个高效、可靠且可重复的解决方案
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联系邮箱:info@abinscience.com | 电话:027--87433958
[1] Moncunill G, Doba?o C, McElrath MJ, De Rosa SC. OMIP-025: evaluation of human T- and NK-cell responses including memory and follicular helper phenotype by intracellular cytokine staining. Cytometry A. 2015 Apr;87(4):289-92. doi: 10.1002/cyto.a.22590. Epub 2014 Nov 18. PMID: 25407958; PMCID: PMC4454451.
abinScience创立于法国,专注于高质量生命科学试剂的开发与生产,立足法国斯特拉斯堡创新科技中心,以"Empowering Bioscience Discovery"为愿景。abinScience流式抗体产品覆盖常用检测指标,品类丰富,可满足多物种(Human/Mouse/Rat/Dog/Hamster/Monkey等)科研实验需求,为科研提供稳定可靠的支持。
www.biomart.cn/55805/index.htm
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