OMIP-023：10色13抗体panel实现人外周血白细胞深度表型分析

发表时间：2026-03-23

方案设计背景与研究目的

OMIP-023旨在通过单管10色流式细胞术，在一次检测中系统性解析人外周血白细胞主要亚群及其活化状态。该方案针对传统多管检测在样本消耗、检测效率及信息整合方面的局限进行了系统优化，适用于需要在有限样本条件下获取全面免疫信息的科研与临床研究场景。

多参数复用的面板构建思路

OMIP-023的核心设计在于通过荧光通道复用提升单位实验的信息密度，将CD8、CD14和CD19共标于FITC通道，并结合散射特性及其他谱系标记实现不同细胞群的有效区分；同时，CD16与CD56共用PE-Cy7通道，用于同步识别中性粒细胞、NK细胞、NKT细胞及单核细胞亚群，从而在单管检测中实现复杂白细胞网络的系统性表征。

样本类型选择与实验流程优化

OMIP-023以新鲜EDTA抗凝外周血及脐带血为检测对象，采用红细胞裂解后的全血检测流程，避免了细胞分离步骤对免疫细胞表型和活化状态的干扰；通过抗体滴度优化与延长孵育时间，在降低抗体用量的同时保持稳定染色效果，为低表达活化标记的可靠检测提供了实验基础。

OMIP-023的核心在于其精炼而强大的抗体-荧光素组合设计。该方案通过巧妙的荧光通道复用策略（如FITC通道同时检测CD8、CD14与CD19），将13种关键抗体整合进10色体系，在单次检测中实现了对外周血所有主要白细胞亚群及其多个功能亚型的系统性深度解析。

一、方案指标

靶标	荧光素	作用	abinScience推荐
CD45	Pacific Blue	Pan-leukocyte antigen	查看CD45抗体
CD3	V500	T-cells	查看CD3抗体
CD4	APC-H7	T-helper cells	查看CD4抗体
CD8	FITC	Cytotoxic T-cells	查看CD8抗体
CD25	ECD	IL-2 Receptor α	查看CD25抗体
CD127	APC-Alexa 700	IL-7 Receptor α	查看CD127抗体
CD19	FITC	B-cells	查看CD19抗体
CD38	PE-Cy5.5	Activated T and B-cells	查看CD38抗体
HLA-DR	APC	MHC-II	查看HLA-DR抗体
CD16	PE-Cy7	Fcγ Rec III	查看CD16抗体
CD56	PE-Cy7	N-Cam	查看CD56抗体
CD14	FITC	LPS co-receptor	查看CD14抗体
CD69	PE	Early activation	查看CD69抗体

二、圈门逻辑及实验结果展示

新闻图片3

_{图1. OMIP-023实验结果总览}

1、图1-2：基础圈门

图1：去黏连
图2：通过CD45/SSC圈出：淋巴细胞（L），单核细胞（M），嗜碱性粒细胞（B），中性粒细胞+嗜酸性粒细胞（N+E）

2、图3-8：嗜中性粒细胞(N)和嗜酸性粒细胞(E)分析（图2中N+E）。

图3：排除掉CD4＋信号
图4：CD16＋＋是中性粒细胞，CD16－是嗜酸性粒细胞:
图5：CD69/CD127分析嗜酸性粒细胞的活化状态
图6：排除CD8+的信号，圈出纯粹的中性粒细胞
图7-8：分析中性粒细胞的活化状态

3、图9-12：嗜碱粒细胞的分析（通过1直接分析，并非图2中的B群）。

图9：排除CD4＋细胞，选择SSClow的群体
图10：排除CD8＋T、CD14＋单核、CD19＋B和CD3＋T
图11：CD38hiCD25＋确定嗜碱性粒细胞
图12：通过CD45/SSC确认嗜碱性粒细胞分析没有问题（与图2中嗜碱性粒细胞位置相同）

4、图13-15：单核细胞群分析（图2中M）。

图13：排除CD8-HLA-DR-细胞群
图14：排除CD4+细胞群
图15：CD14/CD16区分不同单核细胞群，经典型单核(A：CD14++, CD16-)，非经典单核 (B：CD14+, CD16++)和中间型单核(C：CD14++, CD16+)

5、图16-19：淋巴细胞及其亚群分析（图2中L）。

图16：圈出CD3+T细胞
图17：圈出NKT细胞和T细胞
图18：分析CD4 T细胞和CD8 T细胞
图19：通过CD25+CD127-圈出Treg细胞

6、图20-23：在CD3-细胞（图16）中，分析非T细胞亚群

图20：排除CD4+信号
图21：NK细胞（CD16+CD56+），浆细胞（CD16/CD56-HLA-DR++）
图22：将NK细胞分为CD8＋NK和CD8－NK两群
图23：将浆细胞分为CD38高表达的浆细胞和CD38variant的B细胞

三、方案解读

1. 多参数免疫表型分析的简化

OMIP-023的突出特点之一是能够在一次实验中对主要的白细胞亚群（如T细胞、B细胞、单核细胞和NK细胞）进行详细表型分析。通过将细胞谱系标记（如CD3、CD8、CD4和CD19）与激活标记（如CD25、CD127和HLA-DR）结合，这一面板不仅能评估细胞组成，还能分析细胞的激活状态。与传统方法相比，减少了多管实验的需求，节省了时间并减少了样本量，特别适用于样本量有限的情况，如儿童或罕见疾病的研究。

2. 创新的荧光和标记物组合

与传统面板依赖单一标记的策略不同，OMIP-023创新性地在同一荧光通道中使用多个标记，以提高实验通量，同时不降低特异性。例如，CD14、CD19和CD8标记被共用在同一荧光通道中，确保能够清晰区分单核细胞、B细胞和T细胞。此方法最大化了荧光通道的利用，使得在有限样本中能够分析更多的免疫细胞类型。

3. 针对细胞亚群的定制化门控策略

OMIP-023的门控策略是另一个关键进展，它利用光散射和荧光信号精确区分不同的细胞亚群。这包括能够识别稀有或难以检测的细胞群体，如调节性T细胞（Tregs）和NK-T细胞。面板还包含专门的门控逻辑，以区分颗粒细胞（如嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和嗜碱性粒细胞），这些细胞通常在标准流式细胞术中难以分辨。

四、适用研究方向

（自身免疫病机制研究）（肿瘤免疫微环境分析）（感染免疫与疫苗评价）（疾病免疫图谱绘制）（造血与免疫发育研究）（炎症性疾病免疫特征解析）

五、小结

OMIP-023通过创新的荧光通道复用策略、分层标记设计及精细化圈门逻辑，成功解决了传统白细胞表型分析“样本用量大、检测效率低、信息不全面”的核心痛点。该方案以“单管实验”实现15种白细胞亚群的表型与活化状态同步检测，兼具高效性、经济性与精准性，既适配临床诊断的标准化需求，又能满足基础科研对免疫细胞精细化分析的要求，为免疫相关疾病的机制研究、诊断标志物筛选及疗法开发提供了强有力的技术支撑，推动免疫分析向标准化、高效化、精细化方向发展。

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参考文献

[1] Bocsi J, Melzer S, D?hnert I, Tárnok A. OMIP-023: 10-color, 13 antibody panel for in-depth phenotyping of human peripheral blood leukocytes. Cytometry A. 2014 Sep;85(9):781-4.

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