靶向 SAA：abinScience助力重塑肺癌免疫微环境的新型免疫治疗策略

研究团队首先利用TISCH2数据库中的单细胞RNA测序数据，对肺腺癌（LUAD）患者样本进行分析。结果发现，SAA在LUAD恶性细胞群中显著高表达，且转移灶样本中SAA高表达亚群的比例在恶性细胞和巨噬细胞中均高于原发灶。免疫功能分析显示，SAA高表达群体与抗原呈递相关基因的差异表达密切相关，细胞间通讯分析进一步证实SAA高表达恶性亚群与多种APCs存在强烈相互作用。这些生物信息学结果初步提示，SAA信号与肺腺癌的免疫抑制微环境密切相关，且可能参与调控抗原呈递过程。

_{Figure 1. 单细胞转录组分析和SAA1+恶性细胞在NSCLC微环境中的分析}

为明确SAA对T细胞功能的调控作用，研究团队建立了体外自体T细胞-肿瘤类器官共培养体系，设置对照组、重组SAA处理组和SAA中和抗体（a-SAA）处理组。流式细胞术分析显示，重组SAA处理显著降低了CD4+和CD8+效应T细胞的比例，同时明显增加CD8+中央记忆T细胞的比例；而SAA中和则可增强效应T细胞反应并抑制记忆细胞形成。这一结果表明，SAA在肿瘤微环境中可直接调控T细胞亚群分化，抑制效应T细胞生成，从而削弱抗肿瘤免疫应答。

_{Figure 2. SAA暴露改变肿瘤类器官共培养中T细胞亚群分布}

1. 树突状细胞（DC）层面

研究团队利用人外周血单个核细胞（PBMCs）与肿瘤类器官建立共培养体系，发现重组SAA处理显著降低了存活CD45+细胞中DC的比例，同时减少了DC群体中活化表型（CD80+）细胞的比例；而a-SAA处理则可恢复甚至提高DC的扩增和活化水平。此外，细胞因子检测显示SAA信号显著影响IL-1β、IFN-γ等与T细胞成熟和抗肿瘤免疫相关的细胞因子释放。这些结果证实，SAA可抑制DC的扩增和活化，削弱其抗原呈递能力。

_{Figure 3. SAA抑制树突状细胞的扩增和激活}

2. 巨噬细胞层面

通过M-CSF诱导PBMCs分化为巨噬细胞，在肿瘤抗原和低浓度LPS模拟的生理激活环境中进行处理。结果显示，重组SAA处理降低了存活CD45+细胞中巨噬细胞的比例，同时显著减少M1型巨噬细胞（CD86+）比例，增加M2型巨噬细胞（CD206+）比例；细胞增殖实验进一步表明，SAA处理使M1巨噬细胞更倾向于静息状态，而a-SAA处理则可逆转这一现象。这提示SAA可抑制巨噬细胞活化并推动其向免疫抑制性M2 表型极化。

_{Figure 4. SAA抑制巨噬细胞活化并促进M2极化}

研究团队构建了SAA过表达（SAAOE）和野生型LLC细胞的小鼠皮下肿瘤模型，给予PD-1抗体联合a-SAA或同型对照治疗。结果显示，SAAOE组肿瘤重量和体积显著大于对照组，而SAAOE+a-SAA组肿瘤生长明显减慢；流式细胞术分析证实，SAA过表达显著减少了肿瘤微环境中T细胞和CD8+T细胞的浸润，而a-SAA处理可有效恢复CD8+T细胞浸润。进一步分析T细胞亚群发现，SAAOE组CD8+效应T细胞（CD44+CD62L-）比例降低、幼稚T细胞比例升高，且颗粒酶B+细胞毒性T细胞比例显著减少，而a-SAA处理可逆转这些表型；免疫组化结果也验证了a-SAA对CD8+T细胞浸润的恢复作用。这些体内数据表明，SAA通过限制细胞毒性T细胞募集和功能分化促进肿瘤生长，而SAA中和可有效增强抗肿瘤免疫。

_{Figure 5. SAA表达增强体内肿瘤生长}

鉴于巨噬细胞作为关键APCs在启动和维持T细胞应答中的核心作用，研究团队对肿瘤浸润巨噬细胞群体进行了详细流式分析。结果显示，与野生型对照组相比，SAAOE+Ctrl组中肿瘤浸润总巨噬细胞（Cd45+Cd11b+F4/80+）的比例显著降低，而SAAOE+a-SAA处理组则可恢复巨噬细胞浸润水平。极化分析表明，SAAOE显著降低了M1型巨噬细胞（CD86+）的频率，并进一步减少了活化的MHC-II+M1巨噬细胞亚群比例；相反，SAAOE+a-SAA处理不仅促进M1极化，还上调了MHC-II的表达。同时，SAAOE组中M2型巨噬细胞比例相对升高，而a-SAA处理可降低其比例。这些结果在体内层面证实，SAA可抑制巨噬细胞浸润、M1极化及活化，进而加剧T细胞活化障碍。

_{Figure 6. SAA在体内抑制巨噬细胞浸润和M1抗原呈递激活}

为直接验证SAA通过调控巨噬细胞功能影响T细胞活化，研究团队设计了巨噬细胞预处理-共培养实验。将PBMC来源的巨噬细胞分别用重组SAA、a-SAA或对照预处理5天，再与自体非粘附PBMCs及肿瘤细胞在IL-2和CD3/CD28刺激下共培养。结果显示，SAA预处理的巨噬细胞使共培养体系中CD8+T细胞比例显著降低，颗粒酶B+细胞毒性T细胞频率明显减少，且肿瘤细胞杀伤相关的LDH释放水平显著降低；而a-SAA 预处理的巨噬细胞可恢复T细胞活化和细胞毒性功能，各项指标均接近或超过对照组水平。这一结果直接证实，SAA通过塑造巨噬细胞的免疫抑制表型，间接抑制CD8+T细胞活化和抗肿瘤活性，而SAA中和可解除这一抑制效应。

_{Figure 7. SAA处理的巨噬细胞在共培养中抑制T细胞激活和细胞毒性}

为揭示SAA调控APCs功能的分子通路，研究团队在THP1细胞中进行了受体抑制剂实验。结果显示，TLR2/4通路抑制剂TIRAPi无法显著逆转SAA对HLA-DR表达的抑制作用，而CD36抑制剂SMS121则以剂量依赖方式恢复了HLA-DR+细胞比例，缓解了SAA的抑制效应。这表明SAA主要通过清道夫受体CD36而非TLR2/4通路抑制巨噬细胞成熟和活化，明确了SAA-CD36轴在调控巨噬细胞功能中的关键作用。

_{Figure 8. SAA通过与CD36相互作用限制巨噬细胞成熟}

本研究通过生物信息学分析、体外细胞实验和体内动物模型的系统性研究，首次完整揭示了SAA介导肺癌免疫抑制的分子机制：肿瘤来源的SAA通过与CD36受体结合，双重抑制DC和巨噬细胞的活化与抗原呈递功能，推动巨噬细胞向M2表型极化，进而削弱CD8+T细胞的募集、分化和细胞毒性功能，最终促进肿瘤进展和免疫治疗耐药。明确了SAA对肿瘤微环境中APCs-T细胞轴的双重调控作用，鉴定CD36为其发挥免疫抑制功能的关键受体，并证实SAA中和抗体可有效恢复抗肿瘤免疫，为肺癌免疫治疗提供了新靶点；其与PD-1抑制剂联合或改善SAA高表达患者疗效，需临床进一步验证。

abinScience为本研究提供了关键的SAA中和抗体（产品货号：HY110010），不仅在体外共培养实验中中和重组SAA功能，验证了其对T细胞分化、DC活化及巨噬细胞极化抑制作用的特异性，还在体内动物实验中通过腹腔注射荷瘤小鼠，成功逆转了SAA过表达引发的肿瘤生长加速与免疫抑制表型，直接证实靶向SAA的治疗潜力，同时为明确SAA-巨噬细胞-T细胞轴的调控关系及CD36通路的作用提供了关键支撑，是验证研究核心假设的重要工具。