作者单位：华中农业大学
根瘤衰老决定豆科植物共生固氮效率，半胱氨酸蛋白酶CYP35是大豆根瘤衰老的正调控因子，但其底物尚不明确。本研究发现，CYP35为组织蛋白酶L类半胱氨酸蛋白酶，Cys149是其关键催化残基。通过酵母双杂交等实验鉴定出8个根瘤富集结节蛋白NEN1–8为CYP35的互作底物；NEN多突变体根瘤衰老加速、固氮酶活性下降，过表达NEN2/NEN5则延缓衰老并提升固氮能力。体外与体内实验证实，CYP35以Cys149依赖的方式切割降解NEN2、NEN5、NEN6、NEN7。转录组分析显示，NEN缺失会上调衰老相关基因、下调生长维持基因。研究揭示CYP35通过水解NEN蛋白启动根瘤衰老，建立了蛋白酶降解底物与根瘤衰老的直接分子关联，为调控根瘤寿命、提升固氮效率提供理论依据。
AtaGenix为本研究制备了大豆NEN2蛋白的兔源多克隆抗体，检测体内NEN2蛋白水平、验证CYP35在体内降解NEN2，是支撑 “CYP35在体内切割NEN2” 这一关键结论的核心试剂。
Au@AgPt 核壳纳米球与金膜复合增强的光纤等离子体SPR传感器，用于新冠病毒S蛋白RBD的定量检测。实验表明，该传感器利用纳米材料局域表面等离子体共振的电场增强效应，显著放大光信号，在1 fg/mL–100 pg/mL范围内线性良好，检测限低至1.74 fg/mL，响应快速且特异性强，可有效区分靶标与对照蛋白。传感器在- 20℃保存6天仍保留87%灵敏度，具备实用潜力。AtaGenix为本研究提供了抗SARS-CoV-2 RBD中和抗体、重组SARS-CoV-2 S蛋白RBD抗原、重组MERS-CoV S蛋白RBD抗原，以及嗜酸性粒细胞阳离子蛋白（ECP）抗原、髓过氧化物酶（MPO）抗原。这些蛋白与抗体是构建免疫传感界面、实现特异性识别的核心材料，抗体用于修饰光纤传感表面作为识别探针，RBD抗原作为标准检测靶标用于标定性能，对照蛋白用于验证传感器特异性。支撑了传感器的偶联修饰、定量校准、特异性测试三大关键实验，确保检测结果的特异性、灵敏度与可靠性。
猪流行性腹泻病毒（PEDV）是高致死性α冠状病毒，给全球养猪业造成重大经济损失，宿主抗病毒机制尚不明确。本研究聚焦肠道稳态调控因子E3泛素连接酶NEDD4，探究其在PEDV感染中的作用。结果显示，PEDV感染在体内外均显著上调 NEDD4表达；NEDD4过表达抑制PEDV复制，敲除则促进复制，其C2结构域对抗病毒功能至关重要。机制上，NEDD4识别病毒引物酶NSP8的SPP基序，介导其K170位点K63型泛素化，经泛素–蛋白酶体系统与NDP52依赖的选择性自噬双通路降解；同时NEDD4上调beclin-1增强细胞自噬，强化抗病毒效果。该机制保守适用于多种α冠状病毒。结论明确NEDD4通过双重途径抑制PEDV感染，为抗PEDV药物研发提供新靶点。
AtaGenix为本研究制备了PEDV NSP8的兔源多克隆抗体，是验证NEDD4与NSP8内源互作、检测病毒NSP8蛋白表达与定位的核心工具，用于免疫共沉淀、Western blot、免疫荧光等关键实验，支撑 “NEDD4结合并泛素化降解NSP8” 的核心结论。
草鱼呼肠孤病毒（GCRV）引发的草鱼出血病严重危害水产养殖，干扰素诱导蛋白（IFIT）是宿主抗病毒先天免疫的关键效应分子。本研究以草鱼与稀有鮈鲫为对象，探究草鱼IFIT8（CiIFIT8）抗GCRV的分子机制。结果显示，CiIFIT8在草鱼多种组织广泛表达，GCRV感染、IFN1及Poly (I:C)均可显著上调其表达，证实其为干扰素刺激基因。细胞过表达CiIFIT8可明显抑制GCRV复制、降低病毒VP2/VP7转录水平与病毒滴度，并抑制细胞整体蛋白翻译。机制上，CiIFIT8通过TPR结构域直接结合真核翻译起始因子EIF4A，阻断EIF4A介导的蛋白翻译起始；EIF4A抑制剂RocA处理也显著抑制GCRV复制，证明EIF4A为GCRV复制所必需。综上，CiIFIT8通过与EIF4A互作抑制病毒蛋白翻译，进而发挥抗GCRV功能，为解析鱼类抗病毒先天免疫机制与防控草鱼出血病提供新靶点。
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