基因组筛查揭示——LRP8是蜱传脑炎病毒入侵宿主细胞的必需因子

蜱传脑炎（Tick-borne encephalitis, TBE）是一种由蜱传脑炎病毒（TBEV）引起的严重神经系统感染疾病，每年欧洲和东北亚报告超过10,000例临床病例，且新流行区不断涌现。尽管有疫苗可用，但覆盖率低，且无特异性治疗药物。TBEV作为一种包膜RNA病毒，与登革热病毒、西尼罗病毒等正黄病毒密切相关，但其进入宿主细胞的宿主因子仍不明确。近年来，基因组筛查技术揭示了多种病毒-宿主相互作用，但针对TBEV的全面筛查尚属首次。

阿尔伯特·爱因斯坦医学院等机构的国际合作研究，通过全基因组CRISPR-Cas9筛查，鉴定出低密度脂蛋白受体相关蛋白8（LRP8，也称ApoER2）作为TBEV的关键受体。LRP8在脑中高表达，此前被报道为某些病毒的进入因子，但其在TBEV感染中的作用及作为治疗靶点的潜力尚未明确。该研究揭示LRP8直接介导TBEV附着、内化和感染，并开发出基于LRP8的可溶性诱饵蛋白，用于阻断感染并保护动物模型。

基因筛查鉴定LRP8为TBEV宿主因子

研究者使用GeCKO v2 CRISPR-Cas9文库在人A549细胞中筛查TBEV Sofjin株的宿主因子。筛查富集的基因包括ER膜复合物、ER相关降解途径、脂噬和RNA复制相关基因，与其他正黄病毒筛查结果一致。但LRP8作为高度富集且独特的击中基因脱颖而出（与其他25个正黄病毒筛查数据集比较，LRP8为最独特击中）。LRP8敲除（KO）显著降低TBEV感染，而过表达增强感染，确认其为必需因子。

Figure 1. 全基因组CRISPR-Cas9筛查鉴定LRP8为TBEV宿主因子

LRP8介导TBEV进入和感染

通过CRISPR–Cas9建立LRP8敲除（KO）细胞株后发现，这些细胞对TBEV的进入和感染显著下降，无论是单周期的RVP颗粒还是真实病毒（包括欧洲型和远东型TBEV毒株）均如此。重新外源表达LRP8可恢复感染能力，说明感染缺陷确实由LRP8缺失导致。使用siRNA沉默LRP8也得到相同结果。相反，过表达LRP8可使感染效率提升约2–10倍，表明LRP8能促进TBEV进入与复制。

进一步检测发现，LRP8对其他正黄病毒（如登革病毒、西尼罗病毒等）感染无显著影响，仅对TBEV具有特异性作用；而对Semliki Forest病毒（SFV）感染有促进作用，与其作为部分甲病毒受体的已知功能一致。因此，研究确认LRP8是TBEV特异的宿主进入受体。

Figure 2. 映射LRP8和TBEV E相互作用的结合位点

LRP8促进TBEV吸附与内吞进入

在A549细胞中，LRP8敲除导致病毒吸附信号极弱，而过表达LRP8（含LA1–2结构）则显著增强病毒在细胞表面的结合和内吞。共聚焦成像显示，37°C孵育后病毒E蛋白信号从细胞膜转移至胞内并与早期内体标志物EEA1共定位，提示LRP8不仅介导病毒附着，还参与内吞转运。相比之下，仅含LA1结构的LRP8突变体无法恢复这些过程。综合结果表明，LRP8通过其LA1–2结构域与TBEV E结合，促进病毒附着并经内吞进入宿主细胞，是TBEV感染的关键早期步骤。

Figure 3. LRP8介导TBEV附着和内化到细胞中

可溶性LRP8诱饵阻断感染并保护小鼠

基于LA1–2与E蛋白的特异结合，研究构建了可溶性LRP8(LA1–2)–Fc诱饵蛋白。该诱饵能以纳摩尔水平浓度剂量依赖性抑制TBEV RVP进入，并显著降低真实病毒在肝细胞和神经细胞中的感染率。体内实验显示，将TBEV与LRP8(LA1–2)–Fc预混或在感染前注射诱饵蛋白，可使小鼠免于致死感染，脑组织病毒滴度降至检测下限，且未观察到病毒RNA信号。说明LRP8–E相互作用不仅介导体外感染，也决定了TBEV在体内的致病性，其阻断可提供强效保护。该结果为开发靶向LRP8的抗病毒策略提供了直接依据。

Figure 4. LRP8在TBEV小鼠模型中对病毒的发病机制是必需的

低密度脂蛋白受体相关蛋白8（LRP8，也称ApoER2，基因名LRP8）是LDLR家族成员，主要在脑中表达，介导载脂蛋白E和Reelin信号，参与神经发育和突触可塑性。结构上含配体结合域（7个LA重复）、EGF样域、β-螺旋桨、O-糖基化域、跨膜域和细胞质尾。生理上调控脂质代谢和神经信号；病理上被某些病毒（如alphavirus）劫持作为进入受体。其作为靶点，强调开发可溶性诱饵或阻断剂，以干扰病毒结合而不影响生理功能，已成为病毒感染领域（如TBEV、alphavirus）的关键干预思路。

abinScience 品牌创立于法国斯特拉斯堡，依托该地区卓越的科研创新生态，专注于高质量生命科学试剂的研发与生产。abinScience始终秉持“Empowering Bioscience Discovery”的愿景，致力于为全球科研人员提供高效、可靠的实验解决方案，赋能前沿生命科学研究。上述研究中的LRP8以及相关的TBEV，abinScience 也提供针对性的产品，作为可直接应用的科研工具，助力推动相关研究。

以下为 abinScience 提供的LRP8及TBEV相关蛋白与抗体产品清单：