新年伊始,普健生物(AtaGenix)持续为多项科研项目提供核心技术支撑,助力合作科研团队在前沿生命科学领域斩获新突破。近期,多篇合作成果相继登陆《Developmental Cell》《Cell Communication and Signaling》等国际权威期刊,研究物种广泛覆盖拟南芥、桔梗等多物种领域,包括钙(Ca)的调控机制、膀胱癌治疗等研究方向,尽显生命科学研究的多元拓展与深度探索。依托专业技术服务全程赋能,普健生物为科研成果的高效产出筑牢坚实保障,持续为科研创新注入强劲动力。
标题:AVP1-mediated pyrophosphate homeostasis coordinates calcium-dependent cellulose synthesis and autoimmunity during leaf growth
钙(Ca)对植物生长和免疫信号至关重要,但相关调控机制尚不明确。本研究以拟南芥为模型,发现液泡 H?焦磷酸酶(AVP1)通过调控胞质无机焦磷酸(PPi)稳态,协调钙依赖的纤维素合成与自身免疫。钙缺乏会降低AVP1丰度,导致PPi积累,进而破坏GTP依赖的微管组装和纤维素合酶3(CESA3)介导的纤维素合成,引发细胞壁完整性受损,激活异分支酸合酶1介导的水杨酸产生,触发自身免疫反应并抑制新叶生长。通过基因手段增强 PPi水解可提升植物耐低钙能力,且该机制在番茄等作物中保守。研究揭示了AVP1和PPi稳态的核心作用,为改良作物在营养限制环境下的耐受性提供了新策略。
AtaGenix提供的定制服务是合成针对拟南芥 PPase1~PPase5 保守蛋白区域(C+MPMIDQGEKDDKII)的 PPases 抗体。该抗体在免疫印迹分析中用于检测胞质可溶性焦磷酸酶(sPPase)的蛋白丰度,验证低钙条件下sPPase蛋白表达受抑的现象,为PPi积累机制的阐明提供了关键实验工具。
标题:Functional characterization of 1-deoxy-D-xylulose-5-phosphate reductoisomerase(DXR) involved in the biosynthesis of triterpenoid saponins in Platycodon grandiflorum
桔梗是传统中药材,三萜皂苷是其核心活性成分,1 - 脱氧 - D - 木酮糖 - 5 - 磷酸还原异构酶(DXR)作为 MEP 途径的限速酶,对萜类合成至关重要,但桔梗中 DXR 基因的功能尚未明确。本研究从桔梗基因组中鉴定出 3 个 PgDXR 基因(PgDXR1-3),发现它们在不同组织中差异表达,且对干旱、ABA、SA、MeJA 等处理有显著转录响应,亚细胞定位分别位于叶绿体、细胞核和细胞质。功能验证显示,仅 PgDXR1 具有体外酶活性,可催化 DXP 转化为 MEP,其过表达能显著提高转基因拟南芥中齐墩果酸含量及桔梗瞬时转化体系中总皂苷含量。酵母单杂交和双荧光素酶实验证实,MYB39 转录因子可结合 PgDXR1 启动子并激活其表达。该研究阐明了 PgDXR1 在桔梗三萜皂苷合成中的关键作用及调控机制,为萜类代谢工程提供了理论基础。
AtaGenix 为研究定制合成了针对 PgDXR1 的特异性兔源多克隆抗体。用于 Western blot 实验,特异性检测不同生长年限桔梗根中 PgDXR1 蛋白的表达水平,验证了 “两年生桔梗根中 PgDXR1 蛋白表达量最高” 的关键结论,且与三萜皂苷积累规律一致。为 PgDXR1 的组织表达特征分析提供了直接实验证据,支撑了 “PgDXR1 参与桔梗三萜皂苷合成” 的核心论点。
标题:Targeting GRB2 with Polyphyllin H overcomes PIKFYVE inhibitor resistance in bladder cancer by blocking Akt–SREBP1–SCD1 pathway
PIKFYVE 抑制剂是膀胱癌治疗的潜在策略,但易引发适应性耐药,其机制尚未明确。本研究发现,PIKFYVE 抑制剂(如 APD)可通过阻断自噬抑制膀胱癌增殖并克服顺铂耐药,但会激活 GRB2 依赖的 EGFR-Akt-SREBP1-SCD1 脂质生成轴作为代偿耐药机制。通过筛选天然产物,鉴定出重楼皂苷 H(PPH)为新型 GRB2 抑制剂,其可特异性结合 GRB2 的 c-SH3/SH2 结构域(关键残基 Phe62、Ile65、Phe182),阻断 Akt-SREBP1-SCD1 通路,抑制脂质合成。PPH 与 PIKFYVE 抑制剂联用在体内外均表现出协同抗肿瘤活性,且无明显毒性。该研究揭示了 PIKFYVE 抑制剂耐药的核心机制,为膀胱癌联合治疗提供了新方案。
AtaGenix 为本研究合成了野生型 GRB2 蛋白。用于解析 PPH 与 GRB2 的相互作用:一是通过 LC-MS 分析验证二者的结合模式,确认非共价可逆相互作用;二是支撑表面等离子体共振(SPR)、细胞热迁移分析(CETSA)及分子动力学模拟等实验,精准测定结合亲和力(KD=8.11 μM),明确关键结合残基及结合自由能。为 “PPH 是特异性 GRB2 抑制剂” 这一核心结论提供了直接实验依据。
标题:Grass carp reovirus VP35 hijacks DHX15 into phase-separated inclusion bodies to evade host antiviral immunity
草鱼呼肠孤病毒(GCRV-II)是导致草鱼出血病的主要病原体,其病毒包涵体(VIBs)的形成机制及免疫逃逸策略尚未明确。本研究发现,GCRV-II 的 VP35 蛋白可通过液 - 液相分离(LLPS)在细胞内和体外形成液态 VIBs。进一步鉴定到宿主 DEAH 盒解旋酶 15(DHX15)是 VP35 的互作蛋白,DHX15 可通过促进 TBK1 磷酸化并稳定 TBK1 避免其自噬降解,从而增强干扰素(IFN)及干扰素刺激基因(ISGs)表达,抑制病毒复制。为逃逸宿主免疫,VP35 将核定位的 DHX15 募集到细胞质 VIBs 中,并通过溶酶体途径降解 DHX15,阻断 IFN 通路激活。该研究揭示了 GCRV-II VP35 介导 VIBs 形成的新机制及通过劫持 DHX15 实现免疫逃逸的策略,为抗 GCRV-II 药物研发提供了新靶点。
AtaGenix 为本研究制备并纯化了针对GCRV-II VP35的兔源多克隆抗体。支撑关键实验验证:一是用于免疫荧光实验,明确 VP35 在细胞内的定位及 VIBs 形成,验证 VP35 与 DHX15 的共定位关系;二是用于 Western blot 实验,检测 VP35 蛋白表达水平及与 DHX15的相互作用;三是在病毒感染实验中,确认 VP35 在感染细胞中的表达及 VIBs 形成动态。为 “VP35 通过 LLPS 形成 VIBs 并劫持 DHX15” 的核心结论提供了直接实验证据。
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